使用TSKgel UP-SW3000進(jìn)行單克隆抗體分析柱

近年來，抗體藥物市場在逐步擴(kuò)大，未來的幾年仍將持續(xù)發(fā)展。越來越多的抗體藥物將會(huì)應(yīng)用到疾病的治療中。尺寸排阻色譜法（SEC）廣泛用于抗體中單體，二聚體，聚集體和片段等的分析和定量中。為實(shí)現(xiàn)更高的分離度和更快的分析時(shí)間，色譜柱生產(chǎn)廠家優(yōu)化了填料顆?；瘜W(xué)和色譜柱填充方法,近年來,2μm和亞2μm粒徑SEC色譜柱相繼問世.

通過這種方法使得一些樣品的分析結(jié)果得到了改善，但由于一些新型抗體藥物具有高度的疏水性，抗體在色譜柱凝膠基質(zhì)上的非特異性吸附使得抗體藥物的分析仍然具有一定的挑戰(zhàn)。在本應(yīng)用指南中，使用TSKgel®UP-SW3000，2μmSEC色譜柱分析單克隆抗體（mAb），并在pH 6.7的磷酸鈉緩沖液中添加15％IPA。如圖所示，峰分離度和保留時(shí)間變化均不受影響。

HPLC實(shí)驗(yàn)條件

色譜柱：TSKgel UP-SW3000，2μm，4.6 mm ID x 30 cm

儀  器：Chromeleon®（7.2版）運(yùn)行的UltiMate®3000 UHPLC系統(tǒng)

流動(dòng)相：100 mmol / L KH2PO4 / Na2HPO4中的15％IPA，pH 6.7，100 mmol / L Na2SO4、0.05％NaN3

流  速：0.30 mL / min

檢  測：紫外線@ 280 nm

溫  度：30?C

壓  力：22 MPa（最大色譜柱壓力為34 MPa）

進(jìn)樣量：5μL，4 mg / mL

樣  品：USP mAb標(biāo)準(zhǔn)品

使用TSKgel UP-SW3000進(jìn)行單克隆抗體分析柱

結(jié)果與討論

將USP mAb標(biāo)準(zhǔn)品注射到TSKgel UP-SW3000 4.6 mm ID×30 cm色譜柱上，利用磷酸鈉緩沖液pH 6.7為流動(dòng)相，樣品具有出色的重現(xiàn)性，如圖1所示。該圖顯示了以0.3 mL / min的流速連續(xù)進(jìn)樣14針USP mAb標(biāo)準(zhǔn)樣品，單體，二聚體，聚集體和碎片峰的保留時(shí)間幾乎不變，每次進(jìn)樣的峰寬和峰形非常一致。

北京綠百草科技發(fā)展有限公司成立于1999年，坐落于北京市昌平區(qū)企業(yè)墅上區(qū)，是一家專業(yè)經(jīng)營純化填料、色譜柱、化學(xué)試劑和實(shí)驗(yàn)室設(shè)備及相關(guān)技術(shù)服務(wù)的科技型企業(yè)，產(chǎn)品主要應(yīng)用于制藥、生物、食品、環(huán)境和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。憑借較好的產(chǎn)品和服務(wù)，綠百草科技與廣大客戶建立了長期穩(wěn)定的戰(zhàn)略合作關(guān)系，被眾多企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)認(rèn)定為“供應(yīng)商"，得到了政府部門的關(guān)懷和有力支持。
    經(jīng)過十多年的快速發(fā)展，綠百草科技創(chuàng)建了產(chǎn)品種類齊全、技術(shù)服務(wù)的色譜耗材平臺(tái)。綠百草科技被眾多國際供應(yīng)商選擇為他們?cè)谥袊鴧^(qū)的代理，包括美國Restek公司、美國Zymo Research生物科技公司、日本三菱化學(xué)株式會(huì)社、加拿大SiliCycle股份有限公司、日本GL Sciences株式會(huì)社、美國Benson聚合物股份有限公司、日本東洋曹達(dá)株式會(huì)社、日本大賽璐化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社、日本Nacalai Tesque株式會(huì)社、日本信和化工株式會(huì)社、日本住化分析株式會(huì)社等。同時(shí)，還提供美國USP標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)EDQM、英國化學(xué)學(xué)會(huì)LGC標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、加拿大TRC標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等。目前，綠百草科技已成為國內(nèi)制藥、生物、食品、環(huán)境和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的較大供應(yīng)商之一。