c18色譜柱的柱越長，總柱效越高（n值越大），柱越長，分析時間也越長。250—300mm是普遍的柱長，實驗室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子，一般用來分離l0到50個組份的中等至復雜混合物；500—600mm，要求較高分辨率的應用，—般用來分離大于50個組份或包含有難分離物質(zhì)的復雜樣品程序升溫分析。

 

　　c18色譜柱的柱效率與柱半徑平方成反比，內(nèi)徑越小柱效越高，但內(nèi)徑越大，柱容量也增加，允許進樣量就越多。當進樣量超過柱容量時，則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立平衡，將會導致色譜蜂畸變，柱分辨率降低，重現(xiàn)性不好。

 

　　因此對于復雜樣品需要準確分離，要使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物，為了增加樣品容量就要使用內(nèi)徑大的柱子，目前實驗室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。

 

　　如何更換色譜柱，液相色譜柱怎么換：

 

　　1、首先把原來儀器上的柱子用甲醇或其他有溶劑沖下干凈后，沖去柱子中殘留的緩沖鹽和之前難以洗脫的組分。

 

　　2、然后把柱子兩邊的PEAK頭擰下來，用配套的塞子將換下的柱子兩頭堵上。

 

　　3、換上新的色譜柱時，應先將需換上的柱子兩邊的塞子旋開，確定好柱子標示的方向后，先接柱子入口端，并使柱子出口端略高于入口端，這樣就使流動相流過柱子時能將其中的氣泡排出，待氣泡排盡后，再接上柱子的出口端。

 

　　4、注意拆柱子時要關(guān)流速，后接柱子時要開流速。